microRNA Reverse Transcription Kit PLUS(microRNA逆转录升级版试剂盒)
发布时间: 2019-01-26 18:06:38
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产品名称 |
品牌 |
货号 |
规格 |
目录价 |
microRNA Reverse Transcription Kit PLUS |
EZBioscience |
EZB-miRT2-plus-S |
20 Rxns×20 µl |
1800 |
microRNA Reverse Transcription Kit PLUS |
EZBioscience |
EZB-miRT2-plus-L |
50 Rxns×20 µl |
3500 |
microRNA Reverse Transcription Kit PLUS
(microRNA加尾法逆转录升级版试剂盒)
Cat. No.: EZB-miRT2-plus
一、试剂盒简介
本试剂盒采用加A法来进行microRNA第一条链cDNA的合成。含基因组DNA去除步骤,在室温反应5分钟即可去除基因组DNA的污染,保证后续结果更加可靠。然后通过Poly(A) Polymerase在microRNA的3,末端加多聚Poly(A)尾,再使用Oligo(dT)-Universal Tag通用逆转录引物进行逆转录反应,最终生成microRNA的cDNA第一链。
本试剂盒通过使用特殊优化设计的通用型逆转录引物来进行microRNA的逆转录反应。另外,本试剂盒包含有通用型3, qPCR引物和U6正向引物(选用),所以只需要再设计microRNA特异性的5, qPCR引物即可进行qPCR反应。
二、产品组分
Components |
EZB-miRT2-S |
EZB-miRT2-L |
gDNA Remover |
22 µl |
55 µl |
miRNA RT Enzyme Mix*1 |
44 µl |
110 µl |
4× miRNA RT Buffer*2 |
110 µl |
275 µl |
Universal 3’ qPCR Primer(10 µM) |
300 µl |
750 µl |
U6 Primer(10 µM) |
60 µl |
150 µl |
Nuclease free ddH2O |
1 ml |
1 ml |
注:以上表格中的反应次数对应于20 µl反应体系的用量。
*1:包括E.coli Poly(A) Polymerase、逆转录酶和RNase Inhibitor;
*2:包括Oligo(dT)-universal tag通用逆转录引物、ATP、buffer和dNTPs。
三、保存条件
本试剂盒建议置于-20℃保存。
四、试剂盒特点
1、通用的加A尾反转录原理,一次反转样品中的不同microRNA。
2、可使用同一RNA模板进行不同microRNA的定量检测,节省样品用量。
3、试剂盒附带通用的PCR下游引物,只需设计特异性的上游引物即可。
4、可对低至50 copies的microRNA进行检测,灵敏度高。
5、可兼容其他品牌的SYBR Green qPCR Mix。
五、注意事项
1、当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2、 gDNA Remover和4× RT Master Mix在使用前需上下颠倒数次或Vortex振荡混匀,轻轻离心后使用。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失,而使酶量不足。
3、分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
备注:PDF版英文说明书请在“技术资料”---“说明书下载”栏目中下载。