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产品/Product
Cell Viability Detection Kit (Luminescence) EZB-CV1
发布时间: 2023-02-16 19:32:19 | 次浏览
Cat. No.: EZB-CV1
 
 
产品名称 品牌 货号 规格 目录价
Cell Viability Detection Kit (Luminescence) EZBioscience EZB-CV1 10 ml  
100 ml 3000
500 ml  
 
 
一、试剂盒简介

        本试剂盒是一款借助ATP依赖的荧光素酶催化的荧光素发光反应，通过化学发光信号测定细胞内ATP含量，从而检测细胞活力或定量检测活细胞数目的试剂盒。试剂盒中的ATP DetectionReagent 为即用型，含有热稳定的荧光素酶(luciferase)和高纯度的荧光素(luciferin)，无需洗涤细胞，也无需更换或去除培养液，直接在细胞培养物中加入本试剂使细胞裂解，释放出 ATP，即可发生如下图1所示的反应。发光强度与ATP的量在一定范围内成正比。本试剂性能优异，具有线性相关性好、特异性高、信号半衰期长等特点。同时具有高度的稳定性，能够在4℃稳定保存数周同时活性不低于在-20℃保存的 85%。



二、产品组分


组分 EZB-CV1-T EZB-CV1 EZB-CV1-L
ATP Detection Reagent 10 ml 100 ml 500 ml
 
注：对于10 ml ATP Detection Reagent：足以在 96孔板中进行100次assays，每次assay用100 μl；或384孔板中进行 400次assays，每次 assay 用 25 μl。
 
三、保存条件

        本试剂盒-20℃避光可保存6个月，-80℃避光可保存2年。过期日期详见产品标签中有效期信息。为了获得最大的光信号，我们建议在-80℃下长期避光保存。该试剂可稳定进行10次冻融循环，活性损失小于10%。
 
四、自备材料
具有发光检测模块的酶标仪、适合于发光检测的标准不透明壁多孔板（贴壁处理的无菌板）、多孔板振板装置、单通道或者多通道移液器、水浴锅。

五、注意事项
1. 温度：发光信号的强度和衰减速率取决于荧光素酶反应速率。温度是影响该酶测定速率并因此影响荧光输出的一个因素。因此为了保持检测结果的一致性，在加样前需要将本试剂与细胞培养物均平衡至室温（约22℃）。注意批量操作时，从37℃ 恒温箱中取出的并在室温下堆叠放置的多孔板比单层放置的多孔板需要更长的时间平衡至室温，未充分平衡可能会使多孔板中心和边缘孔间出现温度梯度效应。
2. 化学物质：不同培养基的化学成分会有差异，这样会影响荧光素酶反应的酶促速率，进而使发光强度和衰减速率会有不同。药物含量较高时可能会干扰荧光素酶反应，从而影响化学发光信号。建议设置含有溶剂的细胞培养液对照孔以排除溶剂的干扰。
3. 多孔板：建议使用适合于发光检测的标准不透明壁多孔板，不同类型的多孔板测得的发光强度也会有所不同。具有透明底部的不透明壁板有利于在显微镜下观察细胞，但使用这类孔板会降低信号强度，并增加孔间干扰：使用黑色多孔板可有效降低孔间影响，但光值损耗较大：使用白色多孔板可有效减少光值损耗，但会存在一定的孔间干扰。建议根据实验需要对不同类型的多孔板进行选择。
4. 混匀：只有当ATP Detection Reaaent与培养的细胞完全混匀后使细胞充分裂解时才能获得最佳的检测结果，悬浮细胞相对于贴壁细胞更容易混合均匀，加样后可省略混匀步骤，对检测结果无显著影响。若待测样品为贴壁细胞，可通过延长振板时间或加大振板频率等操作提高混匀与裂解效率。384 孔板相较于96孔板更不易混匀，混匀时可能需要使用半径小于孔直径的特殊电磁振动设备。建议通过显微观察确定细胞的裂解程度，以优化混匀方案。
5. ATP污染：严格的无菌技术对于防止ATP Detection Reaent的ATP污染至关重要。进行实验操作时，戴上手套并避免接触可能被污染的表面和设备，且尽可能使用不含ATP的移液器和移液器吸头。
 
备注：

1. PDF版说明书请在“技术资料”---“说明书下载”栏目中下载。
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