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产品/Product
2×SYBR Green qPCR Mix（预混ROX2）
发布时间: 2018-11-18 16:30:12 | 次浏览


产品名称 品牌 货号 规格 目录价
2×SYBR Green qPCR Mix
（ROX独立包装）		 EZBioscience A0001 5 ml 1000
2×SYBR Green qPCR Mix
（预混ROX1）		 EZBioscience A0001-R1 5 ml 1000
2×SYBR Green qPCR Mix
（预混ROX2）		 EZBioscience A0001-R2 5 ml 1000
2×SYBR Green Color qPCR Mix（彩色qPCR试剂盒） EZBioscience A0012 5 ml 1200

2×SYBR Green qPCR Master Mix ( ROX2 plus)
 

Cat. No.: A0001-R2
 
一、试剂盒简介
        本试剂盒采用了具有超强扩增能力和抗干扰能力的热启动DNA聚合酶，结合其高度优化的缓冲液体系和染料系统，使之具备了更强的扩增效率、抗干扰能力，更高的灵敏度和特异性。具有起峰更早，在相同情况下得到的荧光信号更强，Ct值更小，熔解曲线特异性更高等特点。此外，为了进一步简化操作，该试剂盒的2× SYBR Green qPCR mix预混了ROX2染料（low Rox），从而只需要将模板cDNA、引物以及 ddH2O添加进去，即可进行qPCR反应。
 
二、产品组分
Components A0001-R2 (500Rxns)
2× SYBR Green qPCR Master Mix*1 5 ml
*1：包含Hot-start DNA Polymerase, dNTPs, Mg2+和Buffer，同时预混了ROX2，用于校正不同孔之间产生的荧光信号误差。
 
三、试剂保存条件
本试剂建议置于-20℃避光保存。
 
四、适用的仪器型号（如果仪器不在下表中，请用A0001-R1或A0001）：
ABI 7500, 7500 Fast, Quanti-Studio 3, 5, 6, 7, 12K Flex, Dx, ViiA™7; Stratagene MX4000™, MX3000P™, MX3005P™
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon 2, Chromo4™;
Cepheid SmartCycler®; Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Illumina Eco qPCR;
Qiagen/Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000;
Roche LightCyclerTM 480;
Thermo Scientific PikoReal Cycler.
 
五、关于qPCR反应是否良好的判断：
1、如果扩增曲线呈典型的S型曲线，背景荧光信号阶段、荧光指数扩增阶段及平台期均完整可见，熔解曲线单峰，内参Ct值在合理范围内（通常可在13 ~ 22之间，典型的内参Ct值在15 ~ 20之间），则可认为该反应正常；
2、如果同一个模板和引物的重复孔数据Ct值相差0.5以内；
同时满足以上两个条件的可以认为数据可用。
 
六、常见的注意事项、操作要点及优化方法：
1、实验开始前首先验证引物是否适用，标准与上述标准类似，主要观察扩增曲线与熔解曲线；
2、引物验证后应该分装为几份，防止污染或降解；
3、RNA的质量及cDNA的质量对qPCR的结果具有很大的影响，应尽量保证RNA不降解，通常建议RNA提取后尽快进行逆转录，避免反复冻融，或者多次逆转录。如果预计使用量较大，则可以一次多逆转几管cDNA。如果条件允许，cDNA建议优先保存在-80℃冰箱。
 
七、关于qPCR引物的设计：
1、首先可以查询Google Scholar中的文献当中的引物，通常中等及以上水平期刊中的qPCR引物绝大多数可以直接使用；
2、NCBI数据库的Blast数据库中的primer blast提供了针对序列或者Gene ID的qPCR引物设计方案，可以每个基因设计2对引物，并进行合成、验证；
3、Primer Bank数据库中有部分已经验证过的引物可用，也可作为参考。
 
 
备注：PDF版英文说明书请在“技术资料”---“说明书下载”栏目中下载。