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产品/Product
EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS (for microRNA) EZB-miRT1
发布时间: 2019-01-31 15:49:39 | 次浏览
Cat. No.: EZB-miRT1


 
产品名称 品牌 货号 规格 目录价
EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS (for microRNA) EZBioscience EZB-miRT1 50 Rxns 4500
 
 
一、试剂盒简介

        本试剂盒是简单快速从细胞到cDNA的一步法试剂盒，无需复杂的microRNA提取步骤，试剂盒中含有gDNA Remover可有效去除基因组DNA，极大降低了基因组DNA的污染。具体过程是：根据细胞数，按照50 µl /10万细胞的量加Cell Lysis Buffer吹吸，充分裂解细胞；吸出4  µl细胞裂解产物，加入2 µl gDNA Remover，室温反应5 min，即可去除基因组DNA。然后配制逆转录体系，充分混匀后，只需37℃反应15 min 、42℃反应10 min即可得到对应细胞内所有microRNA的cDNA。

二、产品组分


组分 EZB-miRT1
(50 Rxns)
Cell Lysis Buffer 11 ml
gDNA Remover 110 μl
miRNA RT Enzyme Mix 110 μl
4× miRNA RT Buffer 275 μl
Universal 3’qPCR Primer (10 μM) 750 μl
U6 Primer (10 μM ) 150 μl
Nuclease free ddH2O 1 ml
 
三、保存条件

        所有组分建议储存在-20℃。

四、试剂盒特点

1. 简单、快速： 仅需4步大约28 min即可得到对应细胞内所有microRNA的cDNA。
2. 基因组残留少：配有gDNA Remover，可有效去除DNA污染。
3. 所需样品少：最低可提取1000个细胞。
4. 安全无毒：不使用苯酚、氯仿、异丙醇、DEPC水等对身体有害的物质。


五、注意事项


1. 本试剂盒是专为qPCR设计的，尽量不要用于基因克隆。
2. 建议用24、48或96孔板培养细胞。细胞密度达到80%为最佳。
3. 细胞从培养箱中取出后建议放在室温，切勿放在冰上，以免影响细胞状态。
4. 初次使用时建议对细胞进行计数，之后可参考细胞估数图进行估数。
5. Cell Lysis Buffer解冻后，需颠倒几次使之充分混匀，再放在冰上以备使用，请勿涡旋振荡。
6. 本试剂盒是根据细胞来加裂解液，裂解液最少应该能够充分覆盖培养孔底部，否则过少容易导致吹出泡沫，或者裂解不充分。
7. gDNA Remover 和4× RT Mix在使用前都要上下颠倒混匀，短暂离心至管底。由于酶保存液中含有高浓度的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。同时，要使用精确、量程适合的移液枪，并且不要使枪头插入液面过深，否则会因枪头壁粘着造成损失，而使酶量不足。
8. 当同时需要进行数次反应时，应先配制各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
 

备注：

1. PDF版说明书请在“技术资料”---“说明书下载”栏目中下载。