首页 — 产品 — microRNA提取及检测
产品/Product
4× miRNA Reverse Transcription Kit (miRNA茎环法逆转录试剂盒) EZB-miRT3
发布时间: 2019-01-03 14:50:01 | 次浏览
Cat. No.: EZB-miRT3




产品名称 品牌 货号 规格 目录价
4× microRNA Reverse Transcription Kit
(microRNA茎环法逆转录试剂盒)		 EZBioscience EZB-miRT3-S 50 Rxns 900
EZB-miRT3-L 100 Rxns 1600
 
 
一、试剂盒简介

        本试剂盒是基于茎环法合成miRNA cDNA第一条链的专用试剂盒，含有基因组DNA去除步骤，可以在室温条件下反应5 min即可去除基因组DNA的污染，保证了后续实验结果更加准确。本试剂盒主要含有2管成分： gDNA Remover中主要包括浓缩的DNase及Buffer；4× miRNA RT Mix中主要包含了逆转录所需的除引物以外的所有成分（逆转录酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTPs等）。只需根据本试剂盒提供的茎环序列和目的miRNA的序列设计针对目标miRNA的特异性逆转录引物，就可快速合成miRNA cDNA第一链。
        该试剂盒采用的新型M-MLV突变体逆转录酶具有很强的抗干扰能力及扩增能力，扩增效率尤佳，15分钟得到的扩增产物量可以达到AMV逆转录酶大约1h的产物量（Ct值相同），因此极大的提高了miRNA的逆转录效率。后续逆转录产物建议用于PCR、qPCR等实验。

二、产品组分


组分 EZB-miRT3-S
 (50 Rxns)		 EZB-miRT3-L
 (100 Rxns)
gDNA Remover 55 µl 110 µl
4× miRNA RT Buffer 275 µl 550 µl
Nuclease free ddH2O 1 ml 2 ml
 
注：以上表格中的反应次数对应于20 µl反应体系的用量。
 
三、保存条件

       本试剂盒建议置于-20℃保存。


四、试剂盒特点


 
1. 基于茎环法microRNA逆转录原理，能特异性地反转出目的microRNA。
2. 含有基因组DNA去除步骤，可充分去除基因组DNA污染，保证后续实验结果更准确。
3. 试剂盒内RT Mix已将酶和Buffer预混好，加样更方便。
4. 可对低至50 拷贝的microRNA进行检测，灵敏度高。
5. 可兼容其他品牌的SYBR Green qPCR Mix。


五、注意事项


1. gDNA Remover 和4× miRNA RT Buffer等各个组分在使用前都要上下颠倒混匀，短暂离心至管底。由于酶保存液中含有高浓度的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。同时，要使用精确、量程适合的移液枪，并且不要使枪头插入液面过深，否则会因枪头壁粘着造成损失，而使酶量不足。
2. 当同时需要进行数次反应时，应先配制各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
3. microRNA 的质量及 cDNA 的质量对 qPCR 的结果具有很大的影响，应尽量防止 microRNA 降解，通常建议 RNA 提取后立即进行逆转录，且避免反复冻融。如果预计使用量较大，则可以一次多逆转几管 cDNA。如果不立即使用 cDNA，则建议保存在-80°C（有利于长期稳定保存）。



备注：

1. PDF版说明书请在“技术资料”---“说明书下载”栏目中下载。