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miRNA RT Kit PLUS (microRNA加尾法逆转录升级版试剂盒) EZB-miRT2-plus
发布时间: 2018-12-10 20:15:41 | 次浏览
Cat. No.: EZB-miRT2-plus




产品名称 品牌 货号 规格 目录价
EZ-press microRNA Reverse Transcription Kit PLUS
(microRNA加尾法逆转录升级版试剂盒)		 EZBioscience EZB-miRT2-plus-S 20 Rxns 1700
EZB-miRT2-plus-L 50 Rxns 3000
 
 
一、试剂盒简介

        本试剂盒采用加A法来进行microRNA第一条链cDNA的合成。含基因组DNA去除步骤，在室温反应5分钟即可去除基因组DNA的污染，保证后续结果更加可靠。然后通过Poly(A) Polymerase在microRNA的3’末端加多聚Poly(A)尾，再使用Oligo(dT)-Universal Tag通用逆转录引物进行逆转录反应，最终生成microRNA的cDNA第一链。
        本试剂盒通过使用特殊优化设计的通用型逆转录引物来进行microRNA的逆转录反应。另外，本试剂盒包含有通用型3’qPCR引物和U6正向引物（选用），所以只需要再设计microRNA特异性的5’qPCR引物即可进行qPCR反应。

二、产品组分


组分 EZB-miRT2-plus-S
 (20 Rxns)		 EZB-miRT2-plus-L
 (50 Rxns)
gDNA Remover 22 µl 55 µl
miRNA RT Enzyme Mix 44 µl 110 µl
4× miRNA RT Buffer 110 µl 275 µl
Universal 3’qPCR Primer
(10 µM)		 300 µl 750 µl
U6 Primer (10 µM) 60 µl 150 µl
Nuclease free ddH2O 1 ml 1 ml
 
注：以上表格中的反应次数对应于20 µl反应体系的用量。
 

三、保存条件

       本试剂盒建议置于-20℃保存。


四、试剂盒特点


 
1. 通用的加A尾反转录原理，一次反转样品中的不同microRNA。
2. 可使用同一RNA模板进行不同microRNA的定量检测，节省样品用量。
3. 试剂盒附带通用的PCR下游引物，只需设计特异性的上游引物即可。
4. 可对低至50 拷贝的microRNA进行检测，灵敏度高。
5. 可兼容其他品牌的SYBR Green qPCR Mix。


五、注意事项


1. gDNA Remover 和4× miRNA RT Buffer等各个组分在使用前都要上下颠倒混匀，短暂离心至管底。由于酶保存液中含有高浓度的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。同时，要使用精确、量程适合的移液枪，并且不要使枪头插入液面过深，否则会因枪头壁粘着造成损失，而使酶量不足。
2. 当同时需要进行数次反应时，应先配制各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
3. microRNA 的质量及 cDNA 的质量对 qPCR 的结果具有很大的影响，应尽量防止 microRNA 降解，通常建议 RNA 提取后立即进行逆转录，且避免反复冻融。如果预计使用量较大，则可以一次多逆转几管 cDNA。如果不立即使用 cDNA，则建议保存在-80°C（有利于长期稳定保存）。



备注：

1. PDF版说明书请在“技术资料”---“说明书下载”栏目中下载。