Cell to cDNA Kit PLUS II (细胞到cDNA一步法升级版试剂盒II) B0003C
发布时间: 2023-02-22 12:57:07
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Cat. No.: B0003C
产品名称 |
品牌 |
货号 |
规格 |
目录价 |
EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS II
(细胞到cDNA一步法升级版试剂盒 II) |
EZBioscience |
B0003C |
100 Preps |
3000 |
一、试剂盒简介
本试剂盒是简单快速从细胞到cDNA的一步法试剂盒,无需复杂的RNA提取步骤。蓝色逆转录试剂,与红色qPCR试剂配合,有效防止加样错误,使加样更简单。试剂盒中含有gDNA Remover可有效去除基因组DNA,极大降低了基因组DNA的污染。具体过程是:根据细胞数,按照50 µl /10万细胞的量加Cell Lysis Buffer吹吸,充分裂解细胞;立即吸出4 µl细胞裂解产物,加入2 µl gDNA Remover,室温反应5 min,即可去除基因组DNA。然后加入逆转录试剂,充分混匀后,只需42℃、15 min即可得到cDNA。
二、产品组分
组分 |
B0003C
(100 Preps) |
Cell Lysis Buffer |
22 ml |
gDNA Remover |
220 μl |
4× Color CRT Mix |
550 μl |
RNase free ddH2O |
2 ml |
三、保存条件
本试剂盒建议置于-20°C 保存。
四、试剂盒特点
1. 简单、快速:一步法20分钟得到cDNA,2小时完成qPCR。
2. 加样简单:蓝色逆转录试剂,与红色qPCR试剂配合,有效防止加样错误,使加样更简单。
3. 基因组残留少:配有gDNA Remover,可有效去除DNA污染。
4. 所需样品少:最低可提取1000个细胞。
5. 安全无毒:不使用苯酚、氯仿、异丙醇、DEPC水等对身体有害的物质。
五、注意事项
1. 本试剂盒是专为qPCR设计的,尽量不要用于基因克隆。
2. 建议用24、48或96孔板培养细胞。细胞密度达到80%为最佳。
3. 细胞从培养箱中取出后建议放在室温,切勿放在冰上,以免影响细胞状态。
4. 初次使用时建议对细胞进行计数,之后可参考细胞估数图进行估数。
5. Cell Lysis Buffer解冻后,需颠倒几次使之充分混匀,再放在冰上以备使用,请勿涡旋振荡。
6. 本试剂盒是根据细胞来加裂解液,裂解液最少应该能够充分覆盖培养孔底部,否则过少容易导致吹出泡沫,或者裂解不充分。
7. 各个组分在使用前都要上下颠倒混匀,短暂离心至管底。由于酶保存液中含有高浓度的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使枪头插入液面过深,否则会因枪头壁粘着造成损失,而使酶量不足。
8. 当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
备注:
1. PDF版说明书请在“技术资料”---“说明书下载”栏目中下载。