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技术资料/Technology
RNA快速提取试剂盒（B0004D）使用注意事项
发布时间: 2018-09-27 10:25:59 | 795 次浏览

RNA快速提取试剂盒（B0004D）使用注意事项

 
1、建议用6孔板或35mm培养皿培养细胞，细胞密度达到70%以上较好；

2、为了防止吹打细胞时产生过多的气泡，可以在加入裂解液后，在室温放置3~5分钟，使细胞充分裂解，然后吹打10下。

3、为了减少裂解过程中气泡的产生，建议吹打时注意以下细节：吹时液体不要完全吹出，枪头里面可以留一点；吸时，液体也不要全部吸完，防止吸进去气泡。

4、吹打充分以后，可以直接将等体积无水乙醇加入孔板中，吹打10下，将可能出现的沉淀吹散，然后加入离心柱中，4000g（大约相当于eppendorf或Thermo离心机的7000rpm）离心1min，弃去液体；

5、DNA酶可以用ddH2O稀释，或者用elution buffer稀释，然后加入柱中央的膜上，室温放置5分钟，然后不要离心，直接加入wash buffer后，12000g离心1分钟；

5、洗涤后，建议空柱离心一次，以充分去除可能残留的wash buffer；

6、洗脱时，洗脱液一定要加到柱子中央的膜上，不能加到侧壁上，否则会因为RNA没有被溶解导致产量大大减少；

7、溶解时建议先放2分钟，离心1分钟，然后将液体吸出来，加入离心柱中央，再放置3分钟，使RNA充分溶解，然后离心。离心后，RNA应迅速转移到冰上放置并测浓度，进行后续实验。